病毒载体因其卓越的CRISPR组分递送能力，在基因治疗研究中扮演着关键角色，尤其在转染难度较大的分化细胞中表现出色。不同类型的病毒载体能够实现有效的体内递送，然而，其生产工艺复杂且成本较高，这在一定程度上限制了其广泛应用。相比于质粒，病毒载体的生产需要额外的步骤，包括将CRISPR组分克隆至转移载体并包装成病毒颗粒，这一劳动密集型过程提升了规模化生产的难度。目前流行的CRISPR递送载体包括慢病毒、腺相关病毒（AAV）和腺病毒，每种载体在转导效率、免疫原性及载体容量等方面各具特色，因而需要根据实验目标做出合理选择。

慢病毒递送方式逐渐成为CRISPR组分递送的热门选择，其基因递送效率与电穿孔相当，特别适合大规模CRISPR文库筛选。慢病毒的一个主要优势在于能将转基因整合至宿主基因组，实现长期表达，这对于过表达实验至关重要。然而，这种基因组整合的特性也带来了潜在的插入突变风险，限制了其在临床体内应用。目前，慢病毒主要用于基础研究及体外基因修饰，例如FDA批准的CAR-T癌症疗法和治疗β-地中海贫血症的Zynteglo。需要注意的是，慢病毒递送CRISPR时，Cas9的持续表达可能导致脱靶效应，而可诱导表达系统或整合酶缺陷型慢病毒（IDLV）则能有效缓解此问题——IDLV能够将基因组整合率降低约500倍。尽管转导效率不如常规慢病毒，但在体外和体内神经元中的递送效率与传统载体相当，为中枢神经系统疾病的治疗带来了独特潜力。

AAV递送方式目前面临两大技术瓶颈：首先是载体容量限制，大约为42kb，远低于慢病毒载体的能力；其次是转导效率相对较低。针对这些问题，研究者们提出了多种解决方案，如使用较小序列长度的SaCas9、双载体共递送策略（分别装载Cas9与gRNA）以及SpCas9分割表达技术，利用两个载体递送SpCas9片段以在细胞内形成完整的SpCas功能蛋白。此外，AAV系统具备独特的临床优势，包括多样化的血清型选择和结合衣壳定向进化技术，极大地提升了递送的精准度和治疗效果。目前虽无基于AAV的CRISPR疗法获得FDA批准，但AAV平台已在其他基因药物中成功应用，例如治疗脊髓性肌萎缩的Zolgensma®，为CRISPR-AAV疗法的临床转化提供了重要参考。

腺病毒递送方式以其优异的安全性和非整合特性，成为替代慢病毒的重要选择，经过多项临床试验验证其可靠性。相较于AAV和慢病毒载体，腺病毒具备显著扩增的装载能力，但其高免疫原性可能会干扰基因编辑效果。目前最常用的Ad5血清型依赖于CAR受体介导细胞转导，这限制了其在多种组织中的适用性。近期研发的Ad5/F35嵌合体成功克服了对CAR受体的依赖，而gutless腺病毒载体（仅保留必要包装序列）不仅降低了免疫原性，还扩大了载体容量（可达33kb），极其适合长基因或多个转基因的表达。在临床转化方面，腺病毒载体还展现了多项突破：例如，EBT-101成为首个静脉注射型CRISPR-HIV治疗载体，已启动I/IIa期临床试验；在肿瘤治疗方面，多项临床前研究已证明其在实体瘤靶向中的优势。尽管FDA已批准首款腺病毒基因疗法，但基于CRISPR的腺病毒疗法仍在临床实验阶段。

在基因编辑技术逐渐成熟的今天，尊龙凯时人生就博将持续关注这一领域的发展，为推动基因治疗研究的不断进步贡献力量。